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《纤维连接蛋白原料质量控制：从分子结构到生物学效价的多维标准》
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《纤维连接蛋白原料质量控制：从分子结构到生物学效价的多维标准》
优质 FN 原料需满足三大核心标准，确保下游应用效果：
- 分子结构完整性：
- SDS-PAGE 检测：主带位于 250kDa，杂带（如 IgG 污染）＜1%，亚基二硫键连接率＞95%，确保 “V” 型活性构象。
- 氨基酸序列：N 端测序匹配度≥99%，RGD 序列完整性通过 Edman 降解法验证，缺失率＜0.5%。
- 生物学效价：
- 细胞黏附试验：L929 成纤维细胞黏附率≥90%，37℃培养 2 小时后细胞存活率＞95%，铺展面积＞1500μm²/ 细胞。
- 促迁移试验：Transwell 小室检测，HUVEC 内皮细胞迁移数≥100 个 / 视野（200×），较空白组提升 3 倍以上。
- 安全性指标：
- 微生物控制：内毒素＜0.1EU/mg（鲎试剂法），无菌检查需培养 14 天无阳性，适用于注射级原料（如眼科凝胶）。
- 残留控制：宿主蛋白残留＜10ppm（ELISA 法），DNA 残留＜10pg/mg（荧光定量 PCR），符合 ICH Q6B 标准。
